在配置顆粒培養基過(guò)程中偶爾會(huì )出現不凝固一搖晃就破碎現象原因

　　在微生物培養時(shí)經(jīng)常會(huì )用到顆粒培養基，但是，在配制培養基過(guò)程中偶爾會(huì )出現不凝固、半凝固或者一搖晃培養基就破碎的現象，這是什么原因?
 

　　大量文獻指出，瓊脂的凝固程度主要受到PH值和瓊脂含量的影響，PH值較低(≤4.0)時(shí)，PH值是影響凝固等級的主要因素;PH值較高(5.0~8.0)時(shí)，瓊脂濃度是影響凝固等級的主要因素。
 

　　藥典上培養基配方中明確規定了PH值和瓊脂含量，如配制操作正常，凝固應是不會(huì )出現問(wèn)題的。為此，我們針對培養基出現的凝固異常進(jìn)行了分析及試驗：
 

　　一、培養基PH值問(wèn)題：培養基滅菌前后PH值有何變化?經(jīng)查閱大量相關(guān)學(xué)術(shù)研究，不同培養基滅菌前后PH普遍有這樣的變化超勢：高壓滅菌前pH值4.5-8.0的培養基滅菌后pH值變化較小，偏酸性的略上升，偏堿性的略下降。但酸性或堿性較強的培養基滅菌前后PH值變化較大。因我們常使用的培養基pH值均在4.5-8.0范圍內，所以偶爾出現的培養基凝固不好應不是PH值影響的。
 

　　二、瓊脂問(wèn)題：瓊脂是培養基zui常用的凝固劑，是一種海藻多糖，PH在4-10之間才會(huì )形成凝膠，且其凝膠強度和瓊脂糖的濃度有關(guān)。目前我們實(shí)驗室使用的均是成熟配方的培養基，為什么會(huì )偶爾出現凝固不好的現象呢?
 

　　在仔細核查了瓊脂粉的生產(chǎn)廠(chǎng)家、批號、保質(zhì)期及配制時(shí)的稱(chēng)量、溶解、定容和轉移等過(guò)程。排除了瓊脂粉質(zhì)量問(wèn)題，但發(fā)現培養基分裝準備高溫滅菌時(shí)，有部分經(jīng)開(kāi)水溶解的瓊脂呈細小顆粒狀沉在瓶底，即未*溶解，后查閱資料發(fā)現，瓊脂加熱至95℃時(shí)才開(kāi)始溶解，說(shuō)明我們用熱水溶解瓊脂時(shí)，瓊脂未能*溶解，這可能是導致培養基難凝固的原因。
 

　　于是我們在配制顆粒培養基時(shí)，先將瓊脂煮沸5分鐘后再分裝、滅菌，后培養基冷卻至40℃時(shí)能*凝固。自瓊脂溶解方式改變后，便未再出現培養基不凝固、半凝固或者一搖晃培養基就破碎的現象。